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elisa檢測(cè)試劑盒的五大檢測(cè)方法介紹News
elisa檢測(cè)試劑盒的五大檢測(cè)方法介紹
更新時(shí)間：2020-06-16 點(diǎn)擊次數(shù)：1705次
elisa檢測(cè)試劑盒是判斷機(jī)體免疫功能的一個(gè)重要指標(biāo)，因而具有重要的實(shí)驗(yàn)室研究?jī)r(jià)值，同時(shí)還可能在臨床上有諸多實(shí)用價(jià)值、包括許多疾病的診斷、病程觀察、療效判斷及細(xì)胞因子治療監(jiān)測(cè)等。細(xì)胞因子試劑盒在感染科，腫瘤科等相關(guān)科室應(yīng)用廣泛。
下面為您介紹elisa檢測(cè)試劑盒的五大檢測(cè)方法：
1、夾心法：分為雙抗體夾心法和雙抗原夾心法，雙抗體夾心法具有高靈敏度、高專一性的優(yōu)勢(shì)，但該法只適用于有多個(gè)結(jié)合位點(diǎn)的抗原檢測(cè)，主要用于檢測(cè)各種大分子抗原--例如在醫(yī)學(xué)檢測(cè)中測(cè)定HBsAg、HBeAg、AFP等疾病相關(guān)的，以及在科研中檢測(cè)細(xì)胞因子等。由于雙抗體夾心法特異性高，在檢測(cè)過(guò)程中有時(shí)會(huì)將樣本和酶標(biāo)抗體同時(shí)加入進(jìn)行反應(yīng)，稱為雙抗體夾心一步法，因?yàn)椴僮鲿r(shí)間短，在商業(yè)化生產(chǎn)中有很大優(yōu)勢(shì)。
2、間接法：使用了二抗增加信號(hào)強(qiáng)度，也使抗體的選擇多樣化，然而間接法容易產(chǎn)生交叉反應(yīng)。間接法只能用于測(cè)定抗體，主要用于疾病的診斷，其優(yōu)點(diǎn)是只需要改變包被抗原，酶標(biāo)抗體是通用的。
3、競(jìng)爭(zhēng)法：是用樣本中的游離抗體/抗原與固相的酶標(biāo)抗體/抗原競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合的分析方法。當(dāng)游離抗體（或抗原）濃度越高，則能與固定抗原（或抗體）結(jié)合的酶標(biāo)抗體（或抗原）就越少，后續(xù)顯色就越淺，即與對(duì)照相比，顯色越淺，表示檢測(cè)樣本中抗體（或抗原）含量越高。該法特別適合小分子物質(zhì)的檢測(cè)也可用于檢測(cè)比較不純的樣本，且重復(fù)性好，但是檢測(cè)的靈敏度和專一性較差。
4、捕獲法：全稱捕獲包被法也稱為反向間接法，主要用于測(cè)定血清中某類抗體亞型如IgM。為排除血清中IgG的干擾，用抗IgM抗體包被后用于捕捉樣本中的IgM，然后加入特異性結(jié)合抗原進(jìn)行后續(xù)檢測(cè)。捕獲包被法常用于對(duì)病毒性感染的早期診斷。
在測(cè)定IgM的實(shí)驗(yàn)中常受到類風(fēng)濕因子（RF，一種能結(jié)合多種動(dòng)物IgG Fc的自身IgM抗體）的干擾，導(dǎo)致假陽(yáng)性反應(yīng)。采用F(ab')或Fab片段制備酶標(biāo)抗體可以消除RF的干擾，這一方法在雙抗體夾心法中也具有同樣的效用。
5、直接法：僅需要抗原和酶標(biāo)一抗，操作簡(jiǎn)便，可避免交叉反應(yīng)，然而該方法要求酶標(biāo)一抗有較高的特異性要求，同時(shí)也并非所有的一抗適合標(biāo)記處理。直接法在實(shí)際運(yùn)用中并不多見(jiàn)，它并不能對(duì)樣本中抗體進(jìn)行定量分析，因?yàn)闃颖局锌贵w是非酶標(biāo)抗體，無(wú)法進(jìn)行后續(xù)顯色，但是該法經(jīng)過(guò)改進(jìn)就是競(jìng)爭(zhēng)法。
